定点转基因是将转基因表达载体敲入到安全港位点，如Rosa26和H11等位点，研究表明这些位点在所有组织都能活跃表达，不会发生随机转基因中出现的转基因沉默的现象。常用来制作过表达或条件过表达小鼠。
条件过表达是在目的基因前面插入loxp-Stop-loxp序列，阻止目的基因表达。当该模型与Cre模型杂交后，在Cre表达的组织中，Stop序列被删除，目的基因能够表达。
过表达小鼠直接获得组成性基因表达小鼠。beats365已经建立稳定高效的Rosa26位点和H11位点的定点转基因系统，已实现长达10 kb的定点转基因。
图1. Rosa26位置敲入转基因表达载体，制备定点转基因小鼠
1. 技术流程：
设计和构建基因编辑工具→ 制备编辑工具和供体DNA→ 显微注射→ 胚胎移植→ 小鼠鉴定筛选→ 表达检测→ 品系建立
2. 技术优势：
-高特异性，定点转基因技术如CRISPR-Cas9、TALEN和ZFN可以在基因组中特定位置进行编辑，确保基因修饰的高特异性。
-精准插入或删除。
-高编辑效率：相比传统的转基因方法，定点转基因技术具有更高的编辑效率，可以更快地获得转基因小鼠。
-遗传稳定性：通过基因编辑获得的转基因小鼠具有遗传稳定性，可以稳定遗传给后代，便于长期研究。
-稳定表达：定点转基因可以确保基因的稳定表达，不会因插入位置不同而引起表达水平的变化。
3. 成功案例：
安全港位点的敲入：利用CRISPR/Cas9技术把置于2C启动子驱动下的tdTomato序列敲入小鼠的H11位点，获得在二细胞期表达tdTomato的小鼠。
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